Fresca înfățișează trei episoade din Evanghelie, vizavi de fresca „Chemarea lui Moise”, de asemenea, de Botticelli, un fel de paralel din Vechiul Testament. Inscripția de pe friza care acoperă fresca se scrie: TEMPTATIO IESU CHRISTI LATORIS EVANGELICAE LEGIS.
Însăși ispita lui Hristos este surprinsă în trei scene în vârful frescei. În stânga, diavolul, sub pretextul unui pustnic, îl convinge pe Iisus pe post să transforme pietre în pâine și să-și satisfacă foamea. În centru, diavolul încearcă să-l facă pe Isus să sară din vârful templului din Ierusalim, înfățișat sub forma Bisericii Sfântului Spirit di Sassia, pentru a experimenta promisiunea lui Dumnezeu de protecție îngerească. În dreapta, diavolul din vârful muntelui îi promite lui Isus bogățiile pământești și puterea asupra lumii dacă îl respinge pe Dumnezeu și îl venerează, diavolul. Isus trimite diavolul departe, iar îngerii vin să-l slujească pe fiul lui Dumnezeu.
În prim plan, un tânăr, vindecat de lepră, vine la marele preot al Templului pentru a-și declara curățenia. În mâinile unui tânăr un bol de jertfă și se presară. Două femei oferă alte ingrediente pentru ritual – păsările de sacrificiu și un pachet de lemn de cedru.
Înaltul Preot îl simbolizează pe Moise, care a adus legea, iar tânărul este Isus, care și-a vărsat sângele și și-a dat viața în numele omenirii, iar după aceea a fost vindecat prin înviere.
Astfel, oportunitatea este proclamată pentru omenire de a se purifica spiritual și de a câștiga mântuirea.
Unele dintre figurile primare sunt portretele contemporanilor autorului, în special cardinalul Pietro Riario, precum și cardinalul Giuliano della Rovere, mai târziu cunoscut sub numele de papa Iulius al II-lea.