„Portretul unei doamne cu un unicorn” a fost listat în catalogul muzeului din secolul XVIII ca „Sfânta Ecaterina”; de fapt: mâinile femeii erau îndoite diferit, o mantie îi acoperea umerii, aici era o roată spartă și o ramură de palmier – embleme ale sfântului martiriu. În timpul restaurării din 1935, a fost dezvăluit sub radiografie că aceste elemente au fost atribuite cu cealaltă mână, iar când stratul superior a fost îndepărtat, imaginea a apărut în forma sa originală, seculară.
Unicornul este un animal mitic, de obicei simbolizează castitatea. De regulă, el a fost prezentat sub forma unui cal grațios, cu un corn ascuțit pe cap. În tabloul Raphael, arată ca un miel cu un corn subțire răsucit, cu aspect ascuțit, în frunte.
Stilul rochiei, schema sa de culori, bijuteriile sunt atent desenate și seamănă cu „Portretul Maddalenei Doni”, „Portretul unei femei însărcinate”.
Artista a oferit feței unei femei tinere o expresie de inocență, blândețe, seriozitate – o gură disproporționat de mică, buzele strâns apăsate, ochii mari vorbesc despre un personaj ascuns, fără a vorbi, contemplativ. Expresia facială serioasă contrastează cu buclele vânturoase ale părului blond încadrând fața destul de tânără a fetei.
Autoria anterioară a fost atribuită lui Perugino, Ridolfo Ghirlandaio, Granachchi, după curățarea minuțioasă a straturilor superioare din 1928, a fost descoperit un portret al unei tinere doamne necunoscute, pe care specialiștii au identificat-o ca fiind opera lui Rafael din prima perioadă florentină, când era pasionat de peisajele de fundal în stilul lui Leonardo, dar nu și ceața, dar clar, ceea ce este tipic pentru lucrările lui Rafael. Influența asupra stilului scris al lui Piero Della Francesca și Perugino este urmărită și ea.